携胰岛素调控基因系统的载体构建及鉴定

作者：吴志香; 袁凤山; 王大会; 邵敬伟

来源：生物技术, 2004, 14(5): 21-23.

DOI：10.3969/j.issn.1004-311X.2004.05.011

• 1型糖尿病
• 胰岛素生长因子结合蛋白1
• 葡萄糖反应元件
• 基因治疗

目的:构建受胰岛素、葡萄糖双向调节的胰岛素分泌调控基因的载体.方法:1.用酚氯仿抽提法提取SD大鼠肝脏基因组DNA,用P1、P2为引物,PCR扩增胰岛素生长因子结合蛋白-1启动子(IGFBP-1);2.选用pUC118作为克隆载体,用分子克隆技术亚克隆三倍体葡萄糖反应元件(GLRE)3;3.运用基因重组技术将IGFBP-1启动子定向插入(GLRE)3的下游.结果:1.PCR扩增出420bp的目的DNA片断,与文献IGFBP-1 DNA大小一致;2.重组体序列分析显示,克隆的基因序列和文献报道的(GLRE)3及IGFBP-1基因序列一致.结论:成功构建携胰岛素调控基因系统的载体pUC118(GLRE)3-IGFBP-1.为1型糖尿基因治疗的进一步实验研究奠定了基础.

• 单位
  福州大学; 中国医科大学; 第一临床学院; 辽宁中医学院