摘要
目的观察环状RNA hsacirc0023404对人骨关节炎(OA)软骨细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法收集10例行膝关节置换术的OA患者的关节软骨,分离软骨细胞并进行传代培养。将人OA软骨细胞分为三组,siRNA组、NC组分别转染hsacirc0023404 siRNA、对照siRNA,Ctrl组未行转染,作用48 h。采用实时荧光定量PCR法检测人OA软骨细胞、人正常软骨细胞及三组hsacirc0023404 siRNA相对表达量,CCK-8法观察三组细胞增殖情况(以光密度值表示),流式细胞术观察三组细胞凋亡情况(以细胞凋亡率表示),ELISA法检测三组细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blotting法检测三组细胞JAK-3、STAT-3蛋白相对表达量。结果人OA软骨细胞与正常软骨细胞hsacirc0023404相对表达量分别为2.77±0.25、1.00±0.10,二者比较P<0.05。siRNA组、NC组、Ctrl组细胞hsacirc0023404相对表达量分别为0.17±0.02、0.98±0.09、1.00±0.09,siRNA组明显低于NC组、Ctrl组(P均<0.01)。siRNA组细胞光密度值均高于NC组、Ctrl组,细胞凋亡率均低于NC组、Ctrl组(P均<0.05);NC组、Ctrl组细胞光密度值、细胞凋亡率比较均无统计学差异(P均>0.05)。siRNA组细胞上清液IL-6、IL-8、TNF-α水平及细胞JAK-3、STAT-3蛋白相对表达量均低于Ctrl组、NC组(P均<0.05);NC组、Ctrl组上述指标比较均无统计学差异(P均>0.05)。结论人OA软骨细胞中hsacirc0023404表达异常升高,下调hsacirc0023404表达可促进人OA软骨细胞增殖、抑制细胞凋亡,其机制可能与抑制炎症因子分泌及JAK/STAT信号通路有关。
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单位石家庄市第三医院; 河北省儿童医院