急性缺血性脑卒中小鼠模型脑组织中miR-21表达对炎症反应和细胞凋亡的影响及相关机制研究

作者：刘高雯; 段颖

来源：现代检验医学杂志, 2023, 38(03): 86-96.

• 微小核糖核酸-21
• 急性缺血性脑卒中
• 炎症反应
• 细胞凋亡

目的 研究急性缺血性脑卒中（acute ischemic stroke, AIS）小鼠模型脑组织中miR-21表达对炎症反应和细胞凋亡的影响，并探讨其相关分子机制。方法 选取C57/BL6小鼠30只随机均分为假手术组、短暂局灶性大脑中动脉闭塞（tran-sient middle cerebral artery occlusion,tMCAO）模型组（利用线栓法构建短暂局灶性大脑中动脉闭塞小鼠模型）及miR-21 agomir激动剂预处理组（tMCAO术后侧脑室注射miR-21 agomir激动剂）。RT-PCR法检测小鼠脑组织中mi R-21表达水平；改良神经严重程度评分（modified neurological severityscore,mNSS）评估小鼠神经功能；2,3,5-三苯基氯化四氮唑（2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色法检测小鼠脑梗死体积；酶联免疫吸附法检测炎症因子（TGF-β1,TNF-α,IL-18和IL-10）水平变化；原位末端标记（terminal-deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end labeling,Tunel）法观察小鼠神经细胞凋亡情况；蛋白免疫印迹法检测TLR4/NF-κB/NLRP3通路相关蛋白及凋亡蛋白（Bcl-2/Bax）表达情况。结果 假手术组﹑tMCAO模型组和miR-21 agomir组小鼠脑组织中miR-21表达水平分别为0.83±0.17,0.50±0.11和1.55±0.32，组间差异有统计学意义（F=43.805,P<0.05）。假手术组小鼠神经功能mNSS评分均为0分，tMCAO组mNSS评分明显高于miR-21 agomir组（11.30±3.42 vs 5.61±1.73），差异有统计学意义（t=12.784,P<0.05）。假手术组小鼠脑组织未出现梗死现象，tMCAO组脑梗死体积（62.72%±5.30%）高于miR-21 agomir组（38.22%±3.31%），差异有统计学意义（t=31.309,P<0.05）。与tMCAO组比较，miR-21过表达明显降低促炎因子TNF-α和IL-18水平，升高抗炎因子TGF-β1和IL-10水平，差异均有统计学意义（t=3.785～9.693，均P<0.05）。假手术组脑组织皮层细胞凋亡数约为9.40±5.21个，明显低于tMCAO组的75.52±12.81个，差异有统计学意义（t=38.552,P<0.05）;miR-21 agomir组细胞凋亡数约为42.41±9.62个，低于tMCAO组，差异有统计学意义（t=19.174,P<0.05）。与tMCAO组比较，miR-21过表达组小鼠脑组织中TLR4, NF-κB,p-NF-κB和NLRP3蛋白表达降低，Bcl-2/Bax表达升高，差异均有统计学意义（t=2.314～3.098，均P <0.05）。结论 miR-21在急性缺血性脑卒中后小鼠脑组织中表达明显下降，其过表达可以调节脑缺血后促炎因子和抗炎因子之间的平衡，改善皮层细胞凋亡，可能是通过调控TLR4/NF-κB/NLRP3通路发挥脑损伤保护作用。

• 单位
  咸阳市中心医院