摘要
为建立一种新型、快速、可视化的病原菌检测方法,使用刀豆蛋白(ConA)-磷酸铜纳米花结合G-四链体对大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)进行可视化检测,通过纳米花中包含的铜离子(Cu2+)催化水解溶液中叠氮和G-四链体片段之间的点击化学反应,最终形成完整G-四链体结构,简化传统检测方法中的固定及洗涤等步骤。在血红素(hemin)的作用下,激活DNAzyme,使其具有类似辣根过氧化物酶(HRP)的活性;利用四氮甲基联苯胺(TMB)作为底物产生肉眼可视的颜色变化,根据其颜色深浅可对靶标细菌的含量进行定性及定量的分析。结果表明,经过各种条件优化试验及灵敏性、特异性试验得出该病原菌纳米花结合G-四链体可视化检测方法稳定、快速、灵敏,且可以应用于多种病原的检测。
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