RIP3/MLKL通过激活4EBP1-eIF4E通路诱导程序性坏死

作者：王树超; 徐玫丽^*

来源：中南大学学报(医学版), 2023, 48(07): 979-985.

• 程序性坏死
• 受体相互作用蛋白3
• 混合谱系激酶域样蛋白
• 真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1
• 真核起始因子4E

目的:程序性坏死是一种由受体相互作用蛋白3(receptor interacting protein 3,RIP3)和混合谱系激酶域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)介导的细胞死亡形式，有研究指出哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路可能参与程序性坏死的调控，真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(eukaryotic translation initiation factor 4Ebinding protein 1,4EBP1)-真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)通路是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白最重要的下游分子通路之一，然而此通路是否参与程序性坏死的发生，目前尚无相关研究。本研究旨在探索4EBP1-eIF4E通路在程序性坏死中是否发生改变。方法:首先向小鼠上皮样成纤维细胞系L929细胞中加入程序性坏死诱导剂TSZ(TNF-α/SM-164/Z-VAD-FMK)，在光学显微镜下观察细胞坏死情况；进一步向敲除RIP3和MLKL基因的L929细胞中加入TSZ，采用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色观察细胞坏死情况，实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测4EBP1和eIF4E的mRNA和蛋白质表达水平。结果:野生型L929细胞用TSZ处理后，坏死细胞增加，4EBP1的mRNA和蛋白质表达水平明显下调且磷酸化的4EBP1(phosphorylated 4EBP1,p-4EBP1)/4EBP1值增加(P<0.05或P<0.01),eIF4E的mRNA表达水平明显上调且磷酸化的eIF4E(phosphorylated eIF4E,p-eIF4E)/eIF4E值增加(均P<0.01)；在敲除L929细胞中的RIP3和MLKL基因后，PI阳性坏死细胞明显减少，4EBP1的mRNA和蛋白质表达水平明显上调且p-4EBP1/4EBP1值下降(P<0.05或P<0.01),e IF4E的mRNA表达水平明显下调且p-eIF4E/eIF4E值下降(均P<0.01)。结论:4EBP1-eIF4E通路在RIP3/MLKL介导的程序性坏死中发生活化。

• 单位
  中南大学湘雅二医院