酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠的作用及机制研究

作者：王婷婷; 郝蕾; 王芮; 张一昕; 王茜^*; 刘温雨

来源：中药新药与临床药理, 2021, 32(05): 619-626.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2021.05.004

• 酸枣仁
• 延胡索
• 肝郁证
• 失眠
• +-Cl-共转运体2(KCC2)" name="keyword">K+-Cl-共转运体2(KCC2)
• +,K+-2Cl-共转运体1(NKCC1)" name="keyword">Na+,K+-2Cl-共转运体1(NKCC1)
• 神经递质
• 小鼠

目的探讨酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠的镇静催眠作用及机制。方法(1)将96只昆明小鼠随机分为4组:正常组、酸枣仁组(2.25 g·kg-1)、延胡索组(1.50 g·kg-1)、酸枣仁-延胡索配伍组(简称配伍组,3.75 g·kg-1),每组24只;每日1次,连续灌胃10 d,然后观察戊巴比妥钠阈下剂量(腹腔注射,35 mg·kg-1)诱导小鼠的睡眠发生率,阈上剂量(腹腔注射,45 mg·kg-1)诱导小鼠的睡眠潜伏期、睡眠时间。(2)将60只昆明小鼠随机分为5组:正常组、模型组、酸枣仁组(2.25 g·kg-1)、延胡索组(1.50 g·kg-1)、配伍组(3.75 g·kg-1),每组12只。采用慢性夹尾刺激和对氯苯丙氨酸(PCPA,400 mg·kg-1)腹腔注射的复合因子造模法复制肝郁型失眠小鼠模型。每日1次,连续灌胃给药14 d。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量,检测垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)及下丘脑促肾上腺皮质激素释放素(CRH)的含量;采用免疫组化法检测垂体ACTH和海马5-HT的蛋白表达;采用q RT-PCR法检测脑组织中K+-Cl-共转运体2(KCC2)、Na+,K+-2Cl-共转运体1(NKCC1)m RNA表达水平。结果(1)与正常组比较,给药组小鼠的睡眠发生率明显提高,睡眠时间显著延长(P<0.01);酸枣仁组及配伍组的睡眠潜伏期显著缩短(P<0.01)。(2)与正常组比较,模型组小鼠血清的NE、DA含量明显升高(P<0.05,P<0.01),5-HT含量明显降低(P<0.01);脑垂体ACTH及下丘脑CRH含量明显升高(P<0.01);垂体中ACTH的表达明显上调(P<0.01),海马中5-HT的表达明显下调(P<0.01);脑组织的KCC2 m RNA表达明显下调(P<0.01),NKCC1 m RNA表达明显上调(P<0.01)。与模型组比较,配伍组小鼠血清的NE、DA含量明显降低(P<0.01),5-HT含量明显升高(P<0.01);脑垂体ACTH及下丘脑CRH含量明显降低(P<0.01);脑垂体中ACTH的表达明显下调(P<0.01),海马中5-HT的表达明显上调(P<0.01);脑组织的KCC2 m RNA表达明显上调(P<0.01),NKCC1 m RNA表达明显下调(P<0.05)。结论酸枣仁-延胡索配伍对肝郁型失眠小鼠具有镇静催眠作用,可能与其调控KCC2、NKCC1基因表达,抑制HPA轴激活,从而调节神经递质水平有关。

• 单位
  河北中医学院