摘要
目的探讨Notch1对骨髓源性脂肪祖细胞(BMAPCs)向脂肪细胞分化的影响。方法无菌取SD大鼠股、胫骨骨髓制作细胞悬液,差速贴壁法培养,流式分析检测细胞表面标志表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time qPCR)检测脂肪相关基因和Notch信号分子表达。Notch1基因沉默实验分为空载体组和Notch1小RNA干扰组。Western blotting检测干扰效率;STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit行细胞成脂诱导。结果 BMAPCs表达CD34、CD44、CD45及CD90,且表达6种脂肪相关基因及Notch信号分子;成脂诱导促进Notch1 m RNA表达(P<0.01);Notch1小RNA干扰抑制Notch1蛋白表达(P<0.05)。Notch1小RNA干扰组的Cebpa、Lpl和Ppaγ、Slc2a4与Fabp4 m RNA表达均较对照显著降低,而pread1 mRNA表达显著增加(P<0.05P<0.01);Notch小RNA干扰显著抑制脂肪细胞百分率(P<0.05)。结论 Notch1基因沉默抑制BMAPCs向成熟脂肪细胞分化。
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单位第三军医大学; 成都军区昆明总医院; 重庆市公安局; 昆明医科大学