细粒棘球绦虫重组GST蛋白的原核表达及生物信息学分析

作者：倪旭健; 孙芬芬; 冯婷婷; 林奇泗; 潘伟^*

来源：中国预防医学杂志, 2019, 20(07): 565-568.

DOI：10.16506/j.1009-6639.2019.07.002

• 细粒棘球绦虫
• 谷胱甘肽s-转移酶
• 原核表达
• 生物信息分析
• 细胞表位
• 表位疫苗

目的原核表达细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-Transferase,GST)蛋白,分析其结构与功能特点。方法将EgGST基因亚克隆于PET-28b表达载体,转化至大肠埃希菌BL21中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导蛋白表达;蛋白经Ni柱纯化后,用SDS-PAGE及Western-blot进行鉴定;并运用DNAstar软件及在线软件预测分析其结构与功能特点。结果重组EgGST蛋白以可溶性形式在大肠埃希菌中高效表达,其相对分子质量为45 000;该蛋白潜在B细胞表位区域为aa 26～33,89～97,116～124,147～158,201～215;潜在T细胞表位区域为aa 12～20,122～120,79～87,61～69,29～37,62～70。结论成功获得可溶性重组EgGST蛋白,该蛋白具有一定的免疫原性,具有成为细粒棘球蚴病疫苗分子潜力。

• 单位
  徐州医科大学