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摘要
目的研制一种能全面检测血清野生及免疫逃逸变异HBsAg的ELISA试剂。方法采用抗HBs G6-mAb包被,羊抗HBs-HRP作示踪抗体,建立双抗体夹心ELISA。采用抗原替代试验,竞争抑制试验与其它多种试验一道对方法的特异性,敏感性与稳定性进行考核,并将其与市售HBsAg ELISA试剂一道用于一组HBV感染相关者的临床检测。结果证实本研究建立的ELISA具有很好的特异性与稳定性,其最低可检测浓度低于0.125 ng/ml。将其与两种市售HBsAgELISA用于乙肝病毒感染相关者检测,三法检测敏感性相当,其阳性率前者(34/177例,19.21%)分别高于或显著高于后两者(14.89%与6.21%,P分别<0.05及<0.01)。采用雅培化学发光试剂对部分本法阳性者进行复核,两法符合数为94.4%(17/18),两者间信号强度亦表现出一定的相关性。结论建立一个特异,敏感而稳定的血清HB-sAg检测ELISA,其对血清免疫逃逸变异HBsAg的检测能力超过国内市售ELISA。
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