紫花苜蓿尖孢镰刀菌ATMT遗传转化体系的建立

作者：王乐; 贾瑞芳; 于飞; 张园园; 林克剑^*

来源：中国草地学报, 2022, 44(09): 11-18.

DOI：10.16742/j.zgcdxb.20210269

• 紫花苜蓿
• 尖孢镰刀菌
• 农杆菌转化法
• 生物学特性
• 致病力

为研究紫花苜蓿尖孢镰刀菌致病的分子机理，将带有潮霉素抗性标记和绿色荧光蛋白报告基因的双元载体，采用根癌农杆菌转化法(ATMT法)转入紫花苜蓿尖孢镰刀菌Ms210分生孢子中，共获得137株阳性转化子。随机挑选15株阳性转化子研究其菌落形态、菌丝生长速率、产孢量、粗毒素分泌量和致病力，结果表明15株转化子中有3株的生长速率比对照显著降低(P<0.05),其中转化子Ms210-04生长速率降低最显著，仅为11.08 mm/d,其余转化子与野生型菌株Ms210差异不显著；15株转化子中有3株的产孢量显著低于菌株Ms210,其中转化子Ms210-14产孢量最低，为7.05×106个/mL,其余转化子与野生型菌株Ms210差异不显著；15株转化子中仅有2株的粗毒素分泌量与菌株Ms210无显著差异，有1株(1.41 mg/mL)显著升高，其余均较菌株Ms210显著降低，转化子Ms210-01粗毒素分泌量最低，仅为0.81 mg/mL;15株转化子中只有4株转化子的致病力较菌株Ms210显著降低，其余均与菌株Ms210无显著差异；说明转化子的生长速率、产孢量、粗毒素分泌量和致病力会因外源基因的随机插入而产生变化。同时，获得1株在上述各方面同菌株Ms210无显著差异的转化子Ms210-03。

• 单位
  内蒙古农业大学; 园艺与植物保护学院; 中国农业科学院草原研究所