猪IFN-γ mRNA Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者：韦天超; 田志军; 周艳君; 安同庆; 肖燕; 彭金美; 姜一峰; 童光志

来源：中国兽医科学, 2009, (02): 168-172.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2009.02.013

• 猪
• IFN-γ
• 荧光定量RT-PCR
• Taq Man荧光探针 porcine
• interferon-γ
• fluorescent quantitative RT-PCR
• TaqMan probe

为建立一种检测猪γ-干扰素(IFN-γ)的荧光定量RT-PCR方法,针对猪IFN-γ基因和管家基因cyclophilin A(CyPA)的核苷酸序列分别设计了特异性引物和TaqMan荧光探针,以重组质粒pMD18-T-IFN-γ和pMD18-T-CyPA为标准品,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并构建猪IFN-γmRNA和CyPA的荧光定量RT-PCR标准曲线。结果表明,建立的方法在1×101~1×107copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,相关系数r2均高达0.999,扩增效率均高于99.0%;可检测至少为100 copies的阳性标准品。该方法具有快速、敏感性高、特异性强和重复...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 中国农业科学院上海兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室; 广西大学