基于高内涵筛选技术的吴茱萸次碱肝毒性研究

作者：郭丽; 路青瑜; 李娇; 杨付梅; 孙黔云^*

来源：中国药理学通报, 2022, 38(10): 1548-1558.

• 吴茱萸次碱
• 肝毒性
• 高内涵筛选技术
• 氧化应激
• HepG2
• MAPK

目的 利用高内涵筛选技术研究吴茱萸次碱(ruteacarpine, RUT)的肝毒性及其可能机制。方法 HepG2细胞暴露于不同浓度的RUT后作用不同时间，MTT法检测细胞活力，采用高内涵检测RUT对细胞存活、细胞核面积、线粒体膜电位(MMP)、ROS、钙离子内流、细胞膜完整性(DIR)和MAPK、NF-κB、JAKs-STATs信号通路活化水平的影响，流式细胞检测细胞凋亡。结果 100μmol·L-1 RUT明显抑制了HepG2细胞的活力(P<0.01),表现为RUT作用24 h后，细胞核面积减少，核形态不均一，作用48 h后存活细胞数量明显减少(P<0.01),并伴随着细胞的早期凋亡(P<0.01);从6 h开始，100μmol·L-1 RUT组细胞内活性氧和钙离子水平明显升高(P<0.01),细胞膜完整性明显降低(P<0.01);100μmol·L-1 RUT作用24 h后，ERK1/2、JNK、STAT3和p38的磷酸化水平明显升高(P<0.01,P<0.05),总蛋白未见明显变化；在3 h可检测到c-Jun、c-Fos的表达上调，与对照组相比，差异具有显著性(P<0.01);在3 h时间点，可明显检测到p-NF-κB p65的表达上调(P<0.01),但NF-κB p65入核不明显。结论 吴茱萸次碱在100μmol·L-1的条件下对HepG2细胞表现出细胞毒性，其毒性机制主要与氧化应激和炎症反应导致的细胞损伤有关。

• 单位
  贵州医科大学; 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室