肿瘤相关成纤维细胞外泌体miR-489靶向Twist1对胃癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化的影响

作者：田宇剑; 吴胜; 李伟; 周城臣^*; 张伟杰

来源：山西医科大学学报, 2021, 52(01): 1-6.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2021.01.001

• 肿瘤相关成纤维细胞
• 外泌体
• 微小RNA-489
• Twist1
• 胃癌
• 迁移
• 侵袭
• 上皮间质转化

目的探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)外泌体微小RNA-489(miR-489)靶向Twist1对胃癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响。方法体外培养胃癌MGC-803细胞和CAFs细胞。CAFs细胞分为正常对照组(不转染)、mimic NC组(转染negative control-miR-489)和miR-489 mimic组(转染hsa-miR-489 mimic),收集各组CAFs细胞外泌体。MGC-803细胞分为对照组、阴性对照组和miR-489组,分别加入各组CAFs细胞外泌体。双荧光素酶报告基因实验验证miR-489与Twist1的靶向关系;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测miR-489、Twist1 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组MGC-803细胞中Twist1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白表达情况; Transwell法检测各组MGC-803细胞迁移、侵袭情况。结果 miR-489与Twist1基因存在靶向结合位点且在CAFs细胞中存在靶向关系。与正常对照组和mimic NC组相比,miR-489 mimic组CAFs细胞外泌体中miR-489水平显著升高(P <0.05),Twist1 mRNA及蛋白水平显著降低(P <0.05)。与对照组和阴性对照组相比,miR-489组MGC-803细胞迁移、侵袭细胞数及细胞中N-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白水平显著降低(P <0.05),E-cadherin蛋白水平显著升高(P <0.05)。结论 CAFs外泌体miR-489通过靶向抑制Twist1表达,对胃癌细胞MGC-803的迁移、侵袭及EMT过程具有抑制作用。

• 单位
  南京大学医学院附属鼓楼医院