难转染悬浮细胞OCI-LY8慢病毒过表达稳定细胞株的构建

作者：黄会杰; 葛岩; 罗国兰; 徐方平; 许洁; 陈洁; 张科平; 刘艳辉

来源：广东医学, 2014, (09): 1323-1326.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.2014.09.011

• Fbw7
• 慢病毒载体
• 悬浮细胞
• 人淋巴瘤细胞
• 感染
• 荧光效率

目的探讨难转染悬浮细胞慢病毒过表达稳定细胞株的构建方法。方法选用人弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞株OCI-LY8为研究对象,分别用Fbw7基因的慢病毒原液、慢病毒浓缩液、慢病毒浓缩液加入终浓度为5μg/mL的1,5-二甲基-1,5-二氮十一亚甲基聚甲溴化物(polybrene)、慢病毒浓缩液加入终浓度为10μg/mL的polybrene 4种方式进行感染。因慢病毒载体含有绿色荧光蛋白报告基因,故通过倒置荧光显微镜观察细胞内荧光的数量及强度来评判上述4种方式的感染效率,并用Real-time PCR和Western blot进行验证。结果慢病毒原液的感染效率极低,仅在少许细胞中看到极微弱...

• 单位
  汕头大学; 广东省人民医院（广东省医学科学院）