H7-HCP-Tir-Intimin高效降低小鼠粪便中大肠杆菌O157:H7排菌

作者：张雪寒; 何孔旺; 叶青; 俞正玉; 倪艳秀; 温立斌; 王小敏; 李彬; 周俊明; 汪伟

来源：中国兽医学报, 2014, 34(03): 465-470.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2014.03.021

• E.coli O157:H7
• 鞭毛
• Ⅳ菌毛
• 紧密素转位受体蛋白
• 紧密素
• 疫苗
• 排菌
• 小鼠

构建BL21(PcoldⅠ-fliC-hcpA-tir-eae),并评价对小鼠的免疫原性,以期研制更加有效的候选免疫原,最大限度降低E.coli O157:H7对食物、环境和人类的危害。将946、423、309、811bp的fliC,hcpA,tir和eae基因被依次克隆,中间添加8个氨基酸的间隔序列,构建重组菌BL21(PcoldⅠ-fliC-hcpA-tir-eae)。进口白油和ISA50V作为佐剂与重组蛋白乳化,制备2种油乳剂疫苗,分别接种4周龄BALB/c雄鼠,二免21d,口服攻击E.coli O157:H7109 CFU/只,每天采集粪便,检测排菌。结果显示,2种重组疫苗均能够诱导高滴度血清IgG。ISA50V佐剂组抗体产生早于进口白油佐剂组,但进口白油佐剂组抗体滴度一致性更好。所有免疫组小鼠排菌极度降低,第1天排菌低于104 CFU/g,第5天检测不到排菌,整个检测期无反弹,而对照组在整个检测期排菌持续很高(>104 CFU/g)。结果表明,四价重组蛋白H7-HCP-Tir-Intimin能够高效降低口服大肠杆菌O157:H7后的排菌,极显著降低细菌的定植,很大程度减少病原传播,对环境和人类的威胁。

• 单位
  江苏省农业科学院; 农业部