科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
花烟草(Nicotiala alata)的花中存在的植物防御素Nicotiala alata defensin 1(NaD1),对多种致病性真菌具有防御活性，在天然防御免疫系统中发挥着重要作用。本研究分别对花烟草根、茎、叶、花组织部分以及伸根期、旺长期、成熟期发育阶段叶片中NaD1基因的表达量进行qRT-PCR定量检测，结果显示，NaD1基因在花中表达量显著高于其他组织，在叶片中的表达量随着植物的生长发育先增加后降低。此外，通过热不对称交错PCR克隆得到NaD1基因5′端上游644 bp的片段，利用BDGP和Plant CARE在线软件分析启动子的转录起始位点及motif元件，发现其含有基本启动子元件和其他顺式作用元件，如光反应元件BOX-Ⅰ、乙烯反应元件ERE以及真菌诱导响应元件TGACG-motif等。通过对花烟草进行光胁迫处理，发现NaD1基因在花中的表达量随着暗处理时间的增长而显著增加，随着光处理时间的增长而显著降低，这与其启动子中存在的光反应元件BOX-Ⅰ相对应。通过启动子5′端缺失分析，构建了pCAMBIA1391z-pNaD1-644∶∶GUS与pCAMBIA1391z-pNaD1-310∶∶GUS两个植物表达载体，利用遗传转化获得包含-644～-1 bp和-310～-1 bp启动子片段的转基因烟草，GUS染色结果表明，NaD1基因启动子的核心区域在-310～-1 bp中，为进一步研究NaD1基因的功能和转录调控机制奠定了基础。
-
单位贵州大学; 贵州省农业科学院
