微小RNA-425调控重组人Dickkopf相关蛋白3对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响

作者：宁金卓; 程帆^*; 余伟民; 饶婷; 李浩勇; 阮远

来源：武汉大学学报(医学版), 2022, 43(02): 233-237.

DOI：10.14188/j.1671-8852.2020.0706

• 膀胱癌
• 微小RNA-425
• 重组人Dickkopf相关蛋白3
• 凋亡
• 迁移
• 侵袭

目的:探讨微小RNA(miR)-425靶向调控重组人Dickkopf相关蛋白3(DKK3)在膀胱癌细胞中对凋亡、迁移及侵袭的影响。方法:选取2017年1月—2019年8月武汉大学人民医院收集的32例膀胱癌组织及癌旁组织样本作为研究对象,采用qRT-PCR法检测膀胱癌组织及癌旁组织中miR-425表达水平;在膀胱癌T24细胞中采用慢病毒建立对照miRNA和miR-425敲降细胞株(NC inhibitor组和miR-425 inhibitor组),采用Western Blot和qRTPCR法检测细胞中DKK3的蛋白及mRNA表达水平,采用生物信息学和荧光素酶报告实验测定miR-425和DKK3的相关性,分别采用双染法流式细胞术、划痕实验、Transwell实验观察细胞凋亡、迁移和侵袭水平的改变。组间比较采用t检验。结果:miR-425在膀胱癌组织中的表达水平(4.29±0.32)高于癌旁正常组织(1.32±0.21),差异有统计学意义(t=43.895,P<0.05)。miR-425表达水平与肿瘤的组织学分级和肿瘤直径相关(P<0.05)。生物信息学和荧光素酶报告实验验证了DKK3是miR-425的下游靶基因。与NC inhibitor组DKK3蛋白(0.23±0.04)和mRNA(1.00±0.18)表达水平相比,miR-425 inhibitor组DKK3蛋白(0.72±0.06)和mRNA(3.21±0.25)表达水平明显增加,差异有统计学意义(t=11.769,P<0.05;t=12.426,P<0.05)。与NC inhibitor组[凋亡率(10.70±1.34)%]相比,miR-425 inhibitor组凋亡水平[(25.20±1.89)%]显著增加,差异有统计学意义(t=10.840,P<0.05)。与NC inhibitor组相比,miR-425 inhibitor组迁移和侵袭数量显著降低,差异有统计学意义(分别为:t=-4.745,P<0.05;t=-9.784,P<0.05)。结论:miR-425在膀胱癌T24细胞中通过靶向DKK3表达,影响细胞凋亡、增殖和侵袭能力。

• 单位
  武汉大学人民医院