摘要
人正常角膜上皮细胞(HCE)经室内环境浓度下的铜(10μmol·L-1)、锰(20、40μmol·L-1)单独及复合暴露后,采用CCK-8法对细胞活力进行检测,使用Annexin V-FITC/PI试剂盒测定了细胞凋亡率,并通过实时荧光定量PCR法从分子水平比较了不同暴露组炎症(NLRP3,IL-1β)和凋亡调控关键基因(Caspase-1,Caspase-3)表达差异.结果显示:低浓度铜或锰单独暴露时,未明显降低细胞活力,而复合暴露后,细胞活力降低至20%~77%,大量细胞变圆并形成空泡,细胞凋亡率增加至69%;铜、锰单独及复合暴露后均会引起炎症基因(IL-1β和NLRP3)的差异表达,铜暴露诱发了Caspase-3的表达,而锰则促进了Caspase-1的转录,铜锰复合暴露后Cu10+Mn20组的Caspase-3在mRNA表达水平上增加了1.8倍,Cu10+Mn40组促炎因子NLRP3表达量明显上升,为对照组的7.32倍(p<0.0001).综上,比起单独暴露,室内环境浓度铜锰复合暴露显著降低了人角膜上皮细胞活力,促进了细胞凋亡.可见,在室内环境健康风险评价或毒性效应研究中应该综合考虑复合污染.
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单位西南林业大学; 温州医科大学附属眼视光医院