摘要
目的基于像素比和粒度分析理论,通过图像处理和分析方法探究客观量化微管结构的方法。方法将常规培养的3 d人脐静脉内皮细胞(HUVEC)按随机数字表法分为正常对照组、微管解聚组和微管聚合组。采用Western blot检测乙酰化α微管蛋白的含量变化。免疫荧光染色后,激光共聚焦显微镜下观察微管形态变化并获取图像。Matlab 7.0编程进行图像分割、增强等处理并提取特征参数。对数据行单因素方差分析、多重比较以及多元判别分析。结果①微管解聚组细胞乙酰化α微管蛋白含量明显低于正常对照组(P<0.05);微管聚合组细胞乙酰化α微管蛋白含量明显高于正常对照组(P<0.05)。②正常对照组细胞微管结构完整,围绕核周束状分布,胞质中少量细小荧光斑;微管解聚组细胞微管纤维断裂,胞质中出现大量点样小荧光斑,呈现弥散性分布;微管聚合组细胞微管纤维数量多且粗大,呈多分支且杂乱的放射样分布,胞质中出现较大荧光斑。③正常对照组、微管解聚组和微管聚合组细胞微管荧光图像中像素比和粒度分析参数(平均粒度、分选度、偏度、峰度)组间差异具有统计学意义(P<0.05)。④根据上述微管量化特征参数,Fisher多元判别分析的准确率达80.0%。结论微管荧光图像像素比和粒度分析的特征参数可作为微管量化分析的客观指标。
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单位创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室; 成都市第二人民医院; 中国人民解放军陆军军医大学