摘要
microRNAs(miRNAs)是一种长度约为22 nt的非编码RNA,在许多重要的生物过程中发挥着关键作用,其中miR-499-5p、miR-199b等多种miRNAs已被证明在猪骨骼肌的生长发育中发挥重要作用。为分析与猪骨骼肌发育相关的miR-148b-3p的靶基因,本研究利用在线工具miRDB、miRWalk、Targetscan、Starbase预测候选靶基因。通过qRT-PCR检测不同品种猪背最长肌和肌内脂肪中候选靶基因的表达情况进一步筛选靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系,qRT-PCR、Western blots检测猪骨骼肌卫星细胞中miR-148b-3p对靶基因表达的影响。结果表明:AGO4与miR-148b-3p呈靶向关系,在猪骨骼肌卫星细胞中miR-148b-3p的过表达抑制了AGO4的mRNA和蛋白质表达水平。综上所述, miR-148b-3p在猪骨骼肌卫星细胞中靶向AGO4并抑制其表达,为进一步研究猪骨骼肌生长的调控机制奠定了基础。
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单位生命科学学院; 白城师范学院; 长春生物制品所有限责任公司; 动物科学学院; 吉林大学