摘要
目的:构建elavl1a-/-突变体斑马鱼,探索elavl1a基因对斑马鱼生存及生长发育的影响。方法:运用CRISPR-Cas9技术构建elavl1a F0代嵌合体斑马鱼,通过与野生型斑马鱼杂交得到F1代斑马鱼,经过基因型鉴定让同一型F1代斑马鱼自交得到elavl1a-/-纯合突变体斑马鱼,通过基因测序及Western blot鉴定,并做相应的数量统计及形态学分析。结果:通过基因测序发现得到的elavl1a-/-突变体斑马鱼在第2个外显子上缺少5个核苷酸,产生移码突变,提前出现终止密码子,仅能够编码部分氨基酸,Western blot未能检测出elavla蛋白表达,且得到的elavl1a-/-突变体斑马鱼的生存率降低,不符合孟德尔遗传,生长发育迟缓。结论:成功构建得到elavl1a-/-突变体斑马鱼,elavl1a基因对斑马鱼生存及发育具有重要作用。
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单位温州医科大学附属第二医院