肝活素敲除小鼠肝再生异常

作者：卜雯婧; 陈慧; 刘贤; 王宪; 孟晓竹; 陈思聪; 杜涵; 杨晓明; 于淼

来源：军事医学, 2018, 42(03): 161-168.

• 小鼠,基因敲除
• 肝再生
• 肝切除术
• 肝损伤
• 印迹法,蛋白质
• 肝细胞核因子类

目的探讨肝活素(hepassocin,HPS)基因敲除对小鼠肝再生能力的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术建立HPS基因敲除小鼠模型,分析小鼠体质量、肝质量及肝病理结构等。建立小鼠70%肝切除模型,收集肝切除后各个时间点肝组织,通过蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)检测p-HDAC3和PCNA的蛋白表达,利用免疫组化检测5-溴脱氧尿苷(Brd U)掺入率,及增殖细胞核抗原(PCNA)和Ki67的表达。采用1%CCl4肝损伤模型,损伤后24 h,收集外周血及肝组织,检测ALT、AST和肝组织HE染色,利用不同浓度的CCl4刺激小鼠肝实质细胞,检测ALT和LDH水平。结果 HPS-/-小鼠与HPS+/+小鼠相比体质量明显增加;HPS基因敲除会延缓70%肝切除手术后小鼠的肝再生并加重CCl4诱导的急性肝损伤。结论 HPS基因敲除造成小鼠肝再生能力减弱,并加重CCl4诱导的肝损伤,提示HPS在肝细胞增殖、抗损伤中发挥重要作用。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 蛋白质组学国家重点实验室; 安徽医科大学