GnIH基因克隆、表达及对幼龄公兔生殖激素的影响

作者：桑雷; 陈冬金; 孙世坤; 高承芳; 王锦祥; 陈岩锋; 谢喜平

来源：畜牧兽医学报, 2022, 1-13.

• GnIH
• 闽西南黑兔
• 基因克隆
• 基因表达
• 生殖激素

旨在获得兔促性腺激素抑制素（gonadotropin-inhibitory hormone，GnIH）基因，检测其在不同组织和不同发育阶段下丘脑中的表达水平，研究其对幼龄公兔生殖激素分泌的影响。本研究以90日龄健康闽西南黑兔公兔为研究对象，采用RACE技术（rapid-amplification of cDNA ends）从下丘脑组织中克隆出GnIH基因，并对序列进行生物信息学分析；采用实时荧光定量PCR方法（real-time quantitative PCR，qPCR）检测GnIH基因mRNA在90日龄公兔不同组织表达水平（n=5）及11、30、60、90、120、150日龄公兔下丘脑中的表达水平（n=6）；连续10 d向80日龄公兔分别注射0、0.5、5和50 μg鹌鹑GnIH相关肽（n=10）。第11天早上采集耳静脉血液后，屠宰公兔，采集睾丸组织，分别检测血清中生殖激素浓度（GnRH、FSH、LH、INHB和T）和睾丸组织中睾酮合成相关酶基因（StarR、3β-HSD和p450scc）mRNA的表达水平。结果表明，兔GnIH基因cDNA全长904 bp，包含5’UTR 41 bp，CDS区606 bp，3’UTR 227 bp，编码201个氨基酸。该基因在90日龄公兔大部分组织中均有表达，其中在下丘脑中表达最高（P＜0.001）；在11到150日龄公兔下丘脑中，90日龄的表达量最低（P＜0.01），90日龄后随着日龄增长而增加极其显著（P＜0.001）。注射GnIH后，50 μg剂量组幼龄公兔的血清睾酮浓度极其显著低于对照组和0.5 μg剂量组（P＜0.001），5 μg剂量组睾酮浓度显著低于对照组和0.5 μg剂量组（P＜0.05），50 μg剂量组的LH浓度显著高于对照组（P＜0.05）；此外，5 μg组的p450scc mRNA表达量极其显著高于其他处理组（P＜0.001），而其他睾酮合成相关酶基因表达量则差异不显著（P＞0.05）。结果提示，GnIH基因可能与LH和睾酮的分泌与合成有关，并参与公兔的生殖发育调控，长期注射高剂量GnIH相关肽会导致公兔对药物不敏感，其具体调控机制还需后续研究。

• 单位
  福建省农业科学院