miR-24-3p/S1PR2信号轴对大鼠RMECs损伤的作用与机制研究

作者：贺蛟龙; 徐云玲^*

来源：重庆医学, 2023, 52(21): 3214-3226.

• 肾脏微血管内皮细胞
• miR-24-3p inhibitor
• 1-磷酸鞘氨醇受体2
• 急性肾损伤模型

目的 研究miR-24-3p/1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)信号轴对肾小球内皮细胞(RMECs)损伤的作用及影响机制。方法 原代分离获得大鼠RMECs,制备急性肾损伤(AKI)模型。采用CCK8检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况、活性氧(ROS)水平，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β的表达；生化试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平；实时荧光定量PCR检测细胞中S1PR2(NM＿017192.2)的mRNA表达水平，Western blot检测S1PR2和凋亡相关基因caspase-3和caspase-9、血管内皮细胞损伤相关因子细胞分裂周期蛋白20(CDC20)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。结果 LPS组TNF-α、IL-1β水平高于control组，miR-24-3p inhibitor+LPS组TNF-α、IL-1β水平高于inhibitor NC+LPS组，差异有统计学意义(P<0.05)。LPS组MDA、SOD水平高于control组，miR-24-3p inhibitor+LPS组MDA水平高于inhibitor NC+LPS组，但SOD水平低于inhibitor NC+LPS组，差异有统计学意义(P<0.05)。LPS组S1PR2 mRNA表达水平高于control组，miR-24-3p inhibitor+LPS组S1PR2 mRNA表达水平低于inhibitor NC+LPS组，差异有统计学意义(P<0.05)。LPS组S1PR2、caspase-9、caspase-3蛋白表达水平高于control组，CDC20、VEGF蛋白表达水平低于control组，差异有统计学意义(P<0.05);miR-24-3p inhibitor+LPS组S1PR2、caspase-3、caspase-9蛋白表达水平低于inhibitor NC+LPS组，CDC20、VEGF蛋白表达水平高于inhibitor NC+LPS组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-24-3p inhibitor通过联动抑制S1PR2表达，下调caspase-3、caspase-9表达，上调CDC20、VEGF表达，实现抑制TNF-α、IL-1β与MDA表达、降低AKI模型对细胞造成损伤的作用。

• 单位
  浙江省立同德医院; 吉首大学; 浙江省中医药研究院