摘要
以东北红豆杉枝叶为原料,采用酶与超声波辅助耦合提取原花色素,通过单因素试验和响应面法优化提取工艺,并通过萃取分离得到了一个原花色素化合物,另外对不同溶剂萃取物及乙酸乙酯萃取物经大孔吸附树脂分离得到的组分进行了抗糖尿病活性实验。结果表明:酶与超声波辅助耦合提取原花色素的最佳工艺条件为60%乙醇溶液为溶剂、酶质量浓度0.15 g/L、液料比14∶1(mL∶g)、酶解时间50 min、酶解温度40℃和超声波功率120 W,在此条件下提取1次的原花色素提取得率为3.84%(提取率为83.48%)。响应面模型显著性检验发现模型的P值为0.000 2,表明差异极显著,回归方程有效,模型具有统计学意义。乙酸乙酯萃取物经AB-8大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶、硅胶柱层析分离纯化得到一个原花色素化合物,通过TOF-MS结构鉴定和紫外全波长扫描,确定该化合物为儿茶素与刺槐亭醇的二聚体原花色素。不同溶剂萃取物及乙酸乙酯萃取物的大孔吸附树脂分离得到的7种组分(CBFr.1~CBFr.7)抗糖尿病活性结果表明:乙酸乙酯萃取物对α-淀粉酶活性和α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为83.60%和63.03%,都有较好的抑制作用;CBFr.1~CBFr.5对α-淀粉酶的半数抑制质量浓度(IC50)值在0.036~0.043 g/L之间,对α-淀粉酶都有较好的抑制能力。CBFr.3对α-葡萄糖苷酶抑制活性最好,其IC50值为0.04 g/L,低于阿卡波糖IC50值0.063 g/L;分析表明CBFr.1~CBFr.4有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,以及一定的α-淀粉酶抑制活性,可以达到降血糖的效果,又减少了因过量降低α-淀粉酶活性而产生的副作用,故CBFr.1~CBFr.4可作为Ⅱ型糖尿病抑制剂。
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