饥饿诱导K562/ADM细胞自噬及其与凋亡的关系

作者：成娟; 薛明明; 马海珍; 张豪; 赵龙

来源：兰州大学学报(医学版), 2018, 44(01): 53-58.

DOI：10.13885/j.issn.1000-2812.2018.01.010

• K562/ADM细胞
• 自噬
• 凋亡

目的探讨饥饿诱导人白血病K562/ADM细胞自噬及与凋亡的关系和可能的机制。方法在培养K562/ADM细胞至对数生长期后,以磷酸盐缓冲溶液培养3、6、9 h后收集细胞,透射电镜观察自噬体,流式细胞仪检测单丹磺酰戊二胺(MDC)染色荧光强度,Annexin V/PI双染检测K562/ADM细胞凋亡,实时荧光定量PCR检测LC3、Beclin-1和Bcl-2基因的m RNA变化,Western blot检测LC3、Beclin-1和Bcl-2蛋白。结果饥饿处理3 h后K562/ADM细胞自噬活性明显增强,透射电镜下观察到典型自噬体的形成,其MDC阳性细胞明显增加,LC3基因m RNA的表达增高,LC3-Ⅱ蛋白表达增加,但随着饥饿时间延长,自噬活性却逐渐降低;饥饿促进K562/ADM细胞凋亡,且凋亡率随饥饿时间延长而逐渐增加。饥饿后K562/ADM的Beclin-1表达与自噬活性改变呈正相关,与凋亡呈负相关;Bcl-2表达与自噬活性改变呈负相关,与凋亡呈正相关。结论饥饿诱导白血病细胞K562/ADM发生保护性自噬,抑制其凋亡的发生,Beclin-1与Bcl-2可能参与了自噬抑制凋亡的机制形成。

• 单位
  兰州大学第一医院