摘要
【目的】了解广东部分地区猪场疑似猪链球菌病的病原血清型、毒力基因特点、耐药性以及致病性。【方法】对4个疑似流行猪链球菌的猪场的送检病料进行细菌分离培养,采用形态学观察、革兰氏染色镜检、16S rRNA测序以及生化试验鉴定分离菌株,通过PCR试验对分离株进行血清型鉴定、毒力基因检测,采用药敏纸片扩散法对分离菌株进行药敏试验,通过活菌计数法绘制生长曲线,通过人工感染昆明小鼠评价各分离菌对小鼠的致病性。【结果】分离株在10%成牛血清的TSA培养基上长出圆形、灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐的小菌落。镜检出革兰氏阳性球菌,短链状排列,生化特性与猪链球菌相符,测序分析后确定为猪链球菌。血清型鉴定结果显示,4株分离菌均为2型猪链球菌,其中有3株的表型为mrp+/epf+/orf2+/gapdh+/sly+/fbps+/gdh+,有1株表型为mrp-/epf-/orf2-/gapdh+/sly+/fbps+/gdh+,共2种毒力基因表型。药敏结果显示,4株分离菌对红霉素、克林霉素、四环素、复方新诺明耐药,对青霉素、氨苄西林敏感。分离菌在4~6 h期间达到生长对数期,培养6 h到达活菌峰值。试验组小鼠在感染猪链球菌后出现精神沉郁、抱团、呼吸急促、尾部发青等症状,随后出现死亡,剖检有不同程度的病理变化。4株菌株半数致死量分别为4.47×107、3.57×107、5.77×107、1.22×108 CFU。【结论】本研究成功分离鉴定出4株2型猪链球菌,4株分离株具有多重耐药性且具有较强的致病力。本研究结果可为广东地区猪链球菌的防控以及疫苗候选株的筛选提供理论参考。
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