结核分枝杆菌H37Rα感染肺泡巨噬细胞外泌体提取及鉴定

作者：马荣; 杨万忠; 戈朝晖^*

来源：宁夏医学杂志, 2023, 45(12): 1071-1073.

DOI：10.13621/j.1001-5949.2023.12.1071

• 结核分枝杆菌
• 巨噬细胞
• 外泌体

目的 建立结核分枝杆菌H37Rα菌株刺激的肺泡巨噬细胞模型，并对外泌体的形态学特征进行分析和鉴定。方法 首先利用结核分枝杆菌H37Rα菌株刺激肺泡巨噬细胞系RAW264.7建立体外细胞实验模型，通过外泌体抽提试剂盒分离和收集感染组与非感染组细胞培养上清液中的外泌体。随后应用透射电镜观察外泌体形态结构，应用纳米颗粒跟踪分析(NTA)技术检测外泌体的粒径，应用蛋白质印迹法检测外泌体表面标志蛋白，应用NTA技术检测外泌体粒径。结果 感染组和非感染组外泌体在透射电镜下均可观察到均一的类圆形或圆形形态，部分呈鹅卵石样，具有完整的双层模型结构。NTA检测发现大多数外泌体颗粒的粒径集中在20～140 nm。Western Blot结果显示外泌体均表达典型标志分子TGS101、CD63、CD81。结论 成功分离出结核分枝杆菌H37Rα菌株刺激RAW264.7产生的外泌体，检测显示具有较高纯度和含量。

• 单位
  宁夏医科大学总医院