miRNA-301a-3p调控结直肠癌对5-氟尿嘧啶敏感性的机制研究

作者：王龙飞; 彭洪^*; 苏强; 杜经纬; 张涛; 田云鸿

来源：西部医学, 2019, 31(08): 1165-1169.

• 微小RNA-301a-3p
• PTEN蛋白
• AKT蛋白
• 结直肠癌

目的探讨miRNA-301a-3p对结直肠癌细胞HCT-8化疗敏感性的影响及可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测结直肠癌亲本细胞株HCT-8和对5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞株HCT-8/FU化疗敏感性,RT-PCR法检测miRNA-301a-3p和PTEN基因在HCT-8和HCT-8/FU细胞中的表达。在HCT-8/FU细胞中转染miRNA-301a-3p inhibitor,CCK-8检测化疗敏感性。通过生物信息学软件分析miRNA-301a-3p的下游靶基因,双莹光素酶报告基因法进行验证。观察抑制PTEN的表达对化疗敏感性的影响,并检测抑制miRNA-301a-3p表达后对PTEN、AKT及pAKT蛋白表达的影响。结果 HCT-8/FU细胞株的化疗敏感性明显低于HCT-8细胞株。miRNA-301a-3p在HCT-8/FU细胞中的表达明显高于HCT-8细胞,但PTEN在HCT-8/FU细胞中的表达则明显低于HCT-8细胞。miRNA-301a-3p inhibitor抑制HCT-8/FU细胞中miRNA-301a-3p的表达后,HCT-8/FU细胞化疗敏感性明显增高。PTEN是miRNA-301a-3p的靶基因。抑制PTEN表达可降低HCT-8/FU细胞化疗敏感性,抑制miRNA-301a-3p表达可提高PTEN蛋白表达,并下调pAKT蛋白表达。结论下调HCT-8/FU细胞株中miRNA-301a-3p的表达可提高细胞的化疗敏感性,其机制可能与miRNA-301a-3p/PTEN/AKT信号通路有关。

• 单位
  南充市中心医院