紫云英苷上调miRNA-513表达对前列腺癌细胞增殖和细胞周期的影响

作者：黄耿; 桂定文; 徐祖伟; 付金伦; 罗帅; 万京桦

来源：肿瘤研究与临床, 2022, 34(02): 81-85.

DOI：10.3760/cma.j.cn115355-20210816-00351

• 前列腺肿瘤
• 微RNAs
• 细胞增殖
• 细胞周期
• 紫云英苷
• 叉头框蛋白R2
• 黄酮类

目的探讨紫云英苷上调miRNA-513(miR-513)对前列腺癌细胞株C4-2B细胞增殖能力及细胞周期的影响。方法选取前列腺癌细胞株C4-2B, 采用125 μg/L紫云英苷作用48 h者为紫云英苷组, 未处理者为对照组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测两组C4-2B细胞增殖能力, 流式细胞术检测细胞周期。采用miRNAMap预测软件预测miR-513的靶基因为叉头框蛋白R2(FOXR2), 并采用双荧光素酶报告基因实验进行验证。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测两组细胞miR-513和FOXR2 mRNA的相对表达水平, 蛋白质印迹法检测两组细胞中FOXR2、细胞周期蛋白依赖性激酶7(CDK7)、β-actin和细胞周期蛋白H(cyclin H)的表达。结果与对照组比较, 培养第2、3、4、5天紫云英苷组C4-2B细胞增殖活力均降低(均P<0.05)。对照组和紫云英苷组S期细胞比例分别为(48.1±3.2)%和(36.0±2.1)%, 紫云英苷组S期细胞比例降低(t=3.12, P=0.021);G2期细胞比例分别为(24.9±3.3)%和(11.8±2.4)%, 紫云英苷组G2期细胞比例降低(t=3.18, P=0.019)。对照组和紫云英苷组C4-2B细胞中miR-513的相对表达水平分别为1.01±0.22和6.55±0.61, 紫云英苷组C4-2B细胞中miR-513的相对表达水平升高(t=7.70, P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验验证FOXR2为miR-513的靶基因。对照组和紫云英苷组C4-2B细胞中FOXR2 mRNA相对表达水平分别为1.04±0.14和0.19±0.06, 差异有统计学意义(t=5.53, P=0.002), 提示紫云英苷促进miR-513表达后, FOXR2 mRNA表达降低。紫云英苷组C4-2B细胞FOXR2、CDK7和cyclin H蛋白相对表达水平较对照组均降低。结论紫云英苷可能通过上调miR-513的表达, 抑制前列腺癌C4-2B细胞增殖, 诱导细胞周期停滞。

• 单位
  黄石市中心医院; 武汉科技大学