摘要
目的探讨柚皮素磷脂复合物(NPC)对实验性脉络膜新生血管NF-κB/i NOS通路的影响。方法建立大鼠脉络膜新生血管模型,随机分为空白对照组、溶媒组、柚皮素(Nar)治疗组、NPC高、中、低治疗组,眼底血管荧光造影(FFA)检查分析评估CNV形成率,脉络膜铺片荧光显微镜观察CNV面积,实时荧光定量聚合酶链锁反应(RT-qPCR)和Western blot分别检测眼后节组织中NF-κB、i NOS、COX-2、VEGF、MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表达。结果 FFA检查可见空白对照组,溶媒组显示有强荧光渗漏,荧光素渗透面积分别扩大180点、175点,占总光凝数192点的93.75%、91.14%;Nar组荧光信号减弱,渗透范围扩大161点,占总光凝点数的83.85%,与空白对照组相比CNV形成率差异有统计学意义(x2=9.454,P=0.000);NPC低、中、高剂量组较空白对照组荧光信号显著减弱,渗透范围分别为143点、120点、105点,分别占总光凝数的74.47%、62.5%、54.68%,光凝4周后CNV形成率差异均有统计学意义(xNPC低2=26.681、xNPC中2=54.857、xNPC高2=76.555,均P=0.000)。治疗4周后,空白对照组、溶媒组新生血管面积最大,两组之间无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组相比,Nar组和NPC组CNV面积明显减少,差异有统计学意义(tNar=15.165,tNPC低=21.411,tNPC中=29.815,tNPC高=34.129,均P=0.000);NPC低、中、高三组组间比较总体差异有统计学意义(F=35.117,P=0.000)。NPC高剂量组CNV面积显著小于低、中剂量组(tNPC低=8.275,PNPC低=0.000;tNPC中=3.529,PNPC中=0.002)。与Nar相比,NPC低、中、高剂量组CNV面积明显减少(tNPC低=8.824,tNPC中=13.920,tNPC高=17.724,均P=0.000);与空白对照组相比,溶媒组6项观察指标mRNA表达水平均无统计学意义(P>0.05);Nar组COX-2、MMP-2、MMP-9mRNA表达水平与空白组相比有统计学意义(tcox-2=10.824,tMMP-2=6.346,tMMP-9=14.710,均P=0.000);NPC低、中、高剂量三组组间在NF-κB、COX-2、VEGFmRNA有统计学意义(FNF-κB=95.681,Fcox-2=65.732,FVEGF=86.90,均P=0.000),NPC低剂量组6项观察指标mRNA表达水平较Nar组降低(tNF-κB=9.824,tiNOS=6.824,tcox-2=9.357,tVEGF=5.824,tMMP-2=5.914,tMMP-9=4.560;均P=0.000),NPC组高剂量组NF-kB、VEGF mRNA水平较低剂量组降低(tNF-κB=35.461,tVEGF=28.175,均P=0.000)。与空白对照组相比,溶媒组6项观察指标蛋白表达水平两组间均无统计学意义(P>0.05);Nar组6项观察指标蛋白水平与空白组相比有统计学意义(tNF-κB=4.261,tiNOS=4.750,tcox-2=3.824,tVEGF=5.432,tMMP-2=3.376,tMMP-9=10.722;均P=0.000);NPC组低剂量组iNOS、COX-2、VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白水平与Nar组比较有统计学意义(tiNOS=12.117,tcox-2=3.227,tVEGF=5.972,tMMP-2=3.631,tMMP-9=4.932;均P=0.000),NPC高剂量组COX-2、VEGF蛋白表达水平较中剂量降低(tcox-2=10.753,tVEGF=6.148,均P=0.000)。结论 NPC影响NF-κB、i NOS的表达,其可能通过NF-κB/i NOS通路影响实验性脉络膜新生血管的形成。
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单位江苏省中医院