氧氟沙星单克隆抗体的制备及生物条形码检测技术的研究

作者：栗慧; 薛瑛辉; 冯亚宁; 金艳丹; 周沫茏; 魏东^*

来源：食品安全质量检测学报, 2023, 14(09): 169-176.

DOI：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2023.09.042

• 氧氟沙星
• 单克隆抗体
• 纳米金复合探针
• 磁性纳米探针
• 生物条形码

目的 制备氧氟沙星单克隆抗体,采用生物条形码技术测定氧氟沙星残留量。方法 采用碳二亚胺法合成氧氟沙星完全抗原后,用免疫原免疫小鼠,将特异性强的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合。通过杂交瘤细胞的多次“筛选-亚克隆”过程,制备氧氟沙星单克隆抗体。其次,制备纳米金复合探针、磁性纳米探针,建立基于荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的生物条形码检测方法,在最优条件下采用荧光定量PCR生物条形码检测方法间接测定动物源性食品中氧氟沙星残留量。结果 氧氟沙星线性回归方程为Y=14.4263logX+0.09184, r2=0.96。在0.1～128.0 ng/mL范围内,检出限为1.14 ng/mL,添加回收实验结果显示,氧氟沙星平均回收率和相对标准偏差分别为85.8%～102.6%、1.8%～2.6%。结论 基于荧光定量PCR生物条形码免疫分析方法检测氧氟沙星的结果可靠,能够应用于实际样品的检测,为氧氟沙星的检测技术提供新的方向。

• 单位
  河北北方学院附属第一医院