摘要
本课题组前期研究发现,低氧下H9c2大鼠心肌细胞呈现凋亡和坏死的形态,黑果枸杞花青素(Lycium ruthenicum Murray anthocyanins,AC)能够有效保护低氧下H9c2大鼠心肌细胞的形态,缓解低氧诱导H9c2大鼠心肌细胞的凋亡。本研究通过构建H9c2心肌细胞体外低氧模型,检测H9c2心肌细胞肌浆网钙ATP酶(SERCA)活性、Ca2+浓度和Ca2+信号通路相关因子钙敏感受体(CASR)、质膜Ca2+ATP酶(PMCA)、钙调蛋白(CaM)和SERCA的mRNA和蛋白表达,探究黑果枸杞花青素通过调节Ca2+稳态对H9c2心肌细胞低氧损伤的影响。结果显示,与常氧组相比,低氧可极显著下调SERCA活性(P<0.05),极显著上调Ca2+浓度(P<0.01);低氧环境下,用黑果枸杞花青素处理后能够极显著上调SERCA活性(P<0.01),显著下调细胞内Ca2+浓度(P<0.05)。与常氧组相比,低氧可显著上调CaM和CASR的mRNA表达水平(P<0.05),下调PMCA的mRNA表达水平,差异不显著(P>0.05);显著下调SERCA的mRNA表达水平(P<0.01);极显著上调CaM和CASR的蛋白表达水平(P<0.01),极显著下调PMCA和SERCA的蛋白表达水平(P<0.01)。与低氧组相比,黑果枸杞花青素能够显著下调CaM和CASR的mRNA表达水平(P<0.05),显著上调PMCA和SERCA的m RNA表达水平(P<0.05);极显著下调CaM的蛋白表达,下调CASR的蛋白表达水平,差异不显著(P>0.05);极显著上调PMCA和SERCA的蛋白表达水平(P<0.01)。结果表明,黑果枸杞花青素能够通过上调Ca2+信号通路因子PMCA和SERCA的mRNA和蛋白表达水平,下调CaM的mRNA和蛋白表达水平以及CASR的m RNA表达水平,以调控低氧造成H9c2心肌细胞内Ca2+失衡,缓解心肌细胞氧化损伤。
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单位青海大学农牧学院