HER4基因siRNA载体的构建及其沉默作用

作者：李新宇; 逄旭光; 葛棣; 宁艳霞; 曾亮

来源：医学研究生学报, 2010, (01): 30-34.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2010.01.001

• HER4
• RNA干扰
• 食管癌
• 细胞 HER4
• RNA interference
• Esophageal carcinoma
• Cell

目的RNA干扰是由双链RNA引发的转录后基因沉默。为了研究表皮生长因子受体对食管癌细胞的作用,文中构建针对人HER4基因的小干扰RNA(siRNA)及其表达载体,转染人食管癌细胞Eca-109,观察其基因沉默效果,探索食管癌基因治疗的新途径。方法根据siRNA设计原则,设计针对HER4基因的两条寡核苷酸链,退火后与载体SUPER.neo gfp连接,然后进行酶切鉴定和DNA序列测定。用脂质体包裹转染食管癌细胞Eca-109,用荧光定量PCR和Western blot方法检测HER4蛋白表达情况。结果经酶切鉴定和DNA测序分析后,提示HER4靶向RNA干扰重组载体构建成功。转染食管癌细胞后,用荧...

• 单位
  复旦大学附属中山医院; 福建医科大学附属泉州第一医院; 复旦大学