6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶对肺癌细胞增殖及铁死亡的影响

作者：邓婉君; 熊慧华; 晁腾飞^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2023, 30(11): 647-653.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2023.11.03

• 肺癌
• 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶
• 铁死亡
• 谷胱甘肽过氧化物酶4
• 脂质过氧化

目的 探讨6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)对肺癌细胞增殖及铁死亡影响，分析6PGD在肺癌中的生物学功能。方法 蛋白质印迹法检测6PGD在人肺癌细胞(PC9、H1975、A549、H1299、H460)和人正常肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)中的表达。选取肺癌A549和H460细胞进行慢病毒转染以敲低6PGD的表达，分别获得A549 sh-NC、A549 sh-6PGD、H460 sh-NC和H460 sh-6PGD组。采用不同浓度(0、20、40和60μmol/L)6PGD活性抑制剂大黄素甲醚分别处理肺癌细胞。采用铁死亡抑制剂ferrostatin-1处理A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD细胞，分别获得A549 sh-6PGD-ferrostatin-1和H460 sh-6PGD-ferrostatin-1组。CCK8法检测细胞增殖能力。流式细胞术检测细胞内脂质过氧化物及活性氧水平，蛋白质印迹法检测细胞内GPX4及SLC7A11水平，组间比较采用t检验。结果 6PGD在肺癌细胞PC9、H1975、A549、H1299和H460的表达量均高于正常肺支气管上皮细胞BEAS-2B,t值分别为33.2、16.7、33.5、9.2和34.9,均P<0.05。慢病毒转染后，A549 sh-6PGD(0.45±0.06)和H460 sh-6PGD组(0.46±0.02)的细胞活力较A549 sh-NC(1.00±0.00)和H460 sh-NC组(1.00±0.00)均降低，t值分别为20.5和56.1,均P<0.001。采用不同浓度(0、20、40和60μmol/L)大黄素甲醚抑制6PGD的功能，结果显示，A549和H460的细胞活力均降低。A549 sh-6PGD-ferrostatin-1(0.74±0.05)和H460 sh-6PGD-ferrostatin-1组(0.78±0.03)的细胞活力较A549 sh-6PGD(0.45±0.06)和H460 sh-6PGD组(0.46±0.02)均增加，t值分别为31.6和14.3,均P<0.05。铁死亡抑制剂可降低大黄素甲醚对A549和H460的细胞毒性。A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD组的脂质过氧化物水平较A549 sh-NC和H460 sh-NC组均增加，t值分别为14.1和63.0,均P<0.001。A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD组的活性氧水平较A549 sh-NC和H460 sh-NC组均增加。蛋白质印迹法结果显示，A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD组的SLC7A11及GPX4蛋白表达水平较A549 sh-NC和H460 sh-NC组均降低。结论 6PGD促进肺癌细胞增殖，且通过减少活性氧水平以及促进GPX4和SLC7A11的表达负调控肺癌细胞铁死亡。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院