层析法分离纯化冷沉淀中人纤维蛋白原

作者：刘环; 张良; 毛馨茸; 张伟; 郭亮; 江砚芳^*

来源：微生物学免疫学进展, 2023, 51(06): 42-47.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2023.06.007

• 人纤维蛋白原
• 血浆冷沉淀
• 层析
• 分离纯化
• 化学物残留
• 纯度

目的 采用离子交换层析技术从人血浆冷沉淀中分离纯化人纤维蛋白原(human fibrinogen, Fg)。方法 采用离子交换层析技术从人血浆冷沉淀中连续制备3批次Fg制品，并根据《中华人民共和国药典》2020版(三部)(简称《中国药典》)的要求检测相关质量指标，首先对Fg制品进行了S/D病毒灭活前后蛋白含量、Fg含量和纯度指标差异性的测定，然后计算层析、超滤、除菌过滤和干热病毒灭活后各级的回收率，再进行干热病毒灭活前后蛋白含量、Fg含量、纯度和凝固活力指标差异性的检测，最后对成品进行物理检查和化学检定分析，并与国内同类产品进行比较。结果 3批次实验结果显示，S/D处理对Fg无显著性影响(P>0.05);Fg各级回收率均值分别为69.0%、59.1%、54.4%和49.0%;干热病毒灭活处理对Fg无显著性影响(P>0.05);Fg物理检查(成品外观、复溶时间、可见异物和渗透压摩尔浓度)结果均合格；化学检定结果均在《中国药典》规定范围内，其中，水分含量为(1.6±0.1)%,TNBP和Tween-80残留量分别为(0.1±0.0)μg/mL和(8.0±2.6)μg/mL,成品的纯度为(83.4±1.3)%,盐酸精氨酸、枸橼酸离子和氯离子含量分别为(35.7±1.5)g/L、(28.0±1.0)mmol/L和(294.7±2.3)mmol/L,HBsAg检测结果均为阴性。Fg成品的关键质量指标与国内同类产品比较均能满足《中国药典》的要求。结论 离子交换层析技术能从人血浆冷沉淀中分离纯化出安全、稳定和可靠的Fg制品。