冷杉梢斑螟化学感受蛋白DabiCSP8的配体结合特性分析

作者：朱垚龙; 王政全; 吴春; 尹宁娜; 刘乃勇^*

来源：植物保护, 2023, 49(03): 50-74.

DOI：10.16688/j.zwbh.2022171

• 冷杉梢斑螟
• 化学感受蛋白
• 结合测定
• β-紫罗兰酮
• 分子对接

采用分子生物学和荧光竞争性结合测定等技术，研究了冷杉梢斑螟Dioryctria abietella雌虫性腺和雌、雄成虫足中高表达的化学感受蛋白DabiCSP8基因的表达特征和功能。定量分析结果表明，DabiCSP8基因在雌虫性腺中显著高表达，表达量分别是雌、雄虫触角的1 232.27倍和3 130.64倍；此外，该基因在雌、雄成虫足中表达量也较高。通过原核表达系统及亲和层析技术获得了13.64 kD的目的蛋白DabiCSP8。结合测定结果表明，DabiCSP8与探针N-苯基-1-萘胺(1-NPN)具有强的结合能力，结合常数(K1-NPN)为(1.61±0.02)μmol/L。β-紫罗兰酮是DabiCSP8的最佳结合配基，解离常数(Kd)为(11.43±0.62)μmol/L。DabiCSP8结合腔内的极性氨基酸精氨酸46(Arg46)能够与β-紫罗兰酮形成两个氢键，暗示Arg46在该化合物的结合中起着重要作用。此外，DabiCSP8与部分杀虫剂具有中等强度的结合能力。

• 单位
  西南林业大学