Marcksl1基因敲除小鼠的建立及造血表型初步分析

作者：李博; 高丽娟; 于磊; 张旭; 李争光; 刘宁; 史旭东; 高凯; 李静; 高珊; 齐晓龙; 张连峰; 马元武

来源：中国比较医学杂志, 2021, 31(05): 108-114.

DOI：10.3969/j.issn.1671-7856.2021.05.018

• Marcksl1
• 敲除小鼠
• 造血干细胞

目的建立Marcksl1基因敲除小鼠,初步探究该基因缺失对造血系统发育的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Marcksl1基因敲除小鼠,通过PCR技术以及Sanger测序方法鉴定小鼠基因型。通过将敲除小鼠与野生型小鼠杂交,分析敲除小鼠的传代情况。通过杂合子小鼠相互杂交,分析发育不同阶段纯合子、杂合子和野生型小鼠的占比。分离小鼠胎肝,利用血常规以及流式细胞术分析该基因缺失对造血系统的影响。结果PCR结合Sanger测序结果表明Marcksl1基因敲除小鼠构建成功。对不同阶段胚胎小鼠基因型鉴定和数量统计,发现小鼠Marcksl1基因敲除造成的胚胎死亡发生于胚胎发育后期。通过血常规与流式细胞分析,结果表明Marcksl1基因缺失在E15.5 d时不影响白细胞,红细胞以及血小板数量,但胎肝中造血干细胞比例显著增多。结论本研究成功建立Marcksl1基因敲除小鼠,并发现该基因缺失影响造血干细胞占比。本研究为进一步了解该基因在胚胎发育和造血系统中的功能提供动物模型。

• 单位
  中国医学科学院医学实验动物研究所; 北京协和医学院