甜瓜自交系‘羊角蜜’植株再生及遗传转化体系的建立

作者：孙科新; 赵欣冉; 王建全; 张颜; 张锐敏; 李秀明; 杨晓玉^*; 史庆华^*

来源：山东农业大学学报(自然科学版), 2023, 54(06): 835-843.

• 甜瓜
• 组织培养
• 遗传转化
• 农杆菌

组培再生体系是进行植物遗传转化、开展功能基因组学研究的前提条件，然而目前甜瓜的组培再生及遗传转化体系仍不成熟，限制了该领域基因的功能研究和育种应用。本研究以薄皮甜瓜(Cucumis melo L.)自交系‘羊角蜜(YJM)’为试材，系统比较和分析了外植体类型、基础培养基、激素浓度、抗生素和农杆菌菌株等因素对其组培再生和遗传转化的影响。结果表明播种后2 d子叶节的不定芽分化率显著高于5 d后子叶节和下胚轴；相较B5、N6、WHITE和SH四种诱导培养基，外植体在MS或LS上具有更高的愈伤诱导率及不定芽分化率；当培养基中6-BA浓度为0.5 mg L-1时，不定芽诱导率最高、生长状态最好；据此提出‘YJM’播种后2 d子叶节的最佳诱导培养基配方为(MS/LS基础培养基+0.5 mg·L-1 6-BA+1 mg·L-1 ABA+30 g·L-1蔗糖+9 g·L-1 Agar)。随后，我们比较了三种生根培养基(MS+9 g·L-1 Agar、MS+0.5 mg·L-1 6-BA+1 mg·L-1 ABA+9 g·L-1 Agar和MS+0.8 mg·L-1 IAA+9 g·L-1 Agar)对‘YJM’不定芽生根的影响，发现MS+0.8 mg·L-1 IAA+9 g·L-1 Agar培养基上不定芽生根率显著高于另外两种。进一步分析了外植体对潮霉素、双丙氨膦和卡那霉素三种抗生素的响应，发现潮霉素和双丙氨膦对子叶节的筛选效果显著优于卡那霉素；相较农杆菌菌株GV3101,EHA105转化‘YJM’外植体效果更佳。

• 单位
  山东农业大学