SPAG6/SPINK2蛋白复合物在小鼠精子顶体形成中的作用初探

作者：张宏伟; 张玲; 陈雅梦; 申鑫; 王恒琦; 柳赟昊^*; 张志兵^*

来源：中华男科学杂志, 2019, 25(03): 202-208.

DOI：10.13263/j.cnki.nja.2019.03.002

• 精子相关抗原6
• 丝氨酸蛋白酶抑制剂2
• 小鼠
• 精子顶体
• 雄性不育

目的:初步探讨精子相关抗原6(SPAG6)在小鼠精子发生过程中顶体形成阶段的表达及其调控作用。方法:采用Western印迹检测出生后小鼠睾丸发育不同阶段(第8、12、16、20、24、28、30、35天)中SPAG6的表达;免疫荧光观察SPAG6在生精细胞中的定位;分别构建SPAG6和SPINK2蛋白表达质粒,以AH109和CHO细胞为对象,采用酵母双杂交及细胞内共定位实验检测SPAG6与SPINK2蛋白间相互作用;免疫荧光检测SPINK2在SPAG6基因敲除(KO)小鼠的睾丸生精细胞中的表达与定位。结果:小鼠出生后第16～28天,SPAG6表达显著升高,且定位于圆形精子细胞的顶体;酵母双杂交实验显示SPAG6/SPINK2组能在选择性培养基(SD/-Leu/-Trp/-His)中生长;CHO细胞共转染SPAG6和SPINK2表达质粒时,SPAG6与SPINK2共定位在细胞核周围;SPAG6 KO小鼠睾丸生精细胞中未检测到SPINK2表达及定位于精子顶体。结论:SPAG6与SPINK2形成蛋白复合体,并可能通过调控SPINK2的稳定表达参与精子顶体形成。

• 单位
  公共卫生学院; 武汉科技大学