Notch4受体激活对K562细胞增殖的影响及机制研究

作者：杨春秀; 胡建娥; 伞景辉; 陈建斌

来源：遵义医学院学报, 2017, 40(02): 172-176.

DOI：10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2017.0037

• Notch4
• K562细胞
• 基因转染
• 靶基因

目的研究Notch4受体激活后对慢性髓系白血病细胞株K562增殖的影响及可能的作用机制。方法用脂质体分别将携带Notch4胞内段（ICN4）的质粒pc DNA 3.1-ICN4及空载体质粒pc DNA 3.1转染入K562细胞,用G418筛选出稳定表达ICN4的细胞株。观察K562细胞ICN4转染后的形态变化,MTT法分析细胞增殖水平,RT-PCR法和Western blot法检测Notch4受体、Hes1、Hey1下游靶基因mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果筛选出稳定表达ICN4的细胞株K562/ICN4细胞,与对照组及空载体组比较,ICN4转染组K562细胞数量减少,胞膜透亮度减小,核染色质固缩,核浆比例减低;ICN4转染后K562细胞生长受抑（P<0.05）,且随时间延长而明显;Notch4受体及Hes1下游靶基因mRNA及蛋白表达水平相似,均较对照组及空载体组表达增强,但Hey1下游靶基因mRNA及蛋白表达水平未见明显变化;细胞周期检测结果示,转染48 h后细胞阻滞于G1期（P<0.05）,S期细胞减少（P<0.05）。结论 Notch4受体激活可抑制K562细胞增殖,其机制可能是通过激活下游靶基因Hes1表达,而调控细胞于G1期而实现的。

• 单位
  遵义医学院附属医院; 重庆市三峡中心医院; 重庆医科大学附属第一医院