摘要
为优化萱藻丝状体扩增条件,提高萱藻丝状体的扩增速率,以实验室萱藻种质库保存的丝状体为实验材料,在单因素实验的基础上,应用Box-Behnken设计对萱藻丝状体扩增条件进行了响应曲面优化探索。结果显示,以增重倍比为指标,确定了扩增萱藻丝状体的最佳条件为温度20.45°C,光照强度78.13μmol/(m2·s),外加氮磷比16.19。在该条件下扩增10 d,萱藻丝状体增重倍比为(299.21%±13.58%),显著高于单因素实验和Box-Behnken设计实验条件下获得的萱藻丝状体增重倍比。实验结果与理论预测值的相对误差小于5%,模型可靠。为评价优化培养后萱藻丝状体的发育情况,对丝状体进行了20 d的诱导,结果显示,优化培养后的萱藻丝状体呈深褐色,细胞质充盈,孢子囊比例(26.37%±5.22%)比对照组的孢子囊比例(18.10%±3.51%)提高了45.69%;优化条件下的孢子囊直径平均为(19.75±0.21)μm,显著高于对照组的孢子囊直径(16.91±0.36)μm。研究表明,在萱藻丝状体扩增过程中,对扩增环境条件进行调控,设置合适的营养盐浓度配比,可以实现较高的扩增速率,并促进丝状体的孢子囊发育。
-
单位生命学院; 中国海洋大学