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摘要
目的探讨子宫内膜异位症(内异症)患者异位子宫内膜(异位内膜)基质细胞中甾体激素受体辅激活子(SRC)和基质细胞衍生因子1(SDF-1)的表达水平变化,了解不同类型SRC对雌二醇和孕酮调控的异位内膜基质细胞SDF-1表达的影响。方法 2010年5月至2012年10月,选择在南京医科大学第一附属医院妇科因卵巢内异症囊肿[美国生育学会修订的内异症分期标准(r-AFS)分期为Ⅲ~Ⅳ期]接受手术治疗,术后标本经病理检查证实为内异症的16例患者的异位内膜(增殖期9例,分泌期7例)及同期因非经期放置宫内节育器的无内异症病史且月经周期正常的健康妇女10例的正常内膜(增殖期5例,分泌期5例)。所有患者术前3个月内均未服用过促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)类药物。采用实时荧光定量PCR技术比较正常内膜和异位内膜在不同月经周期中SRC-1、SRC-2、SRC-3和SDF-1αmRNA表达水平。异位内膜基质细胞分离、培养、传代后,分别用含有10-8mol/L的17β-雌二醇或10-8mol/L的17β-雌二醇+10-6mol/L孕酮的培养液继续培养。分别于培养24、48、72、96 h后收集上清液,采用ELISA法检测上清液中SDF-1α的蛋白表达水平。脂质体法分别介导SRC-1和SRC-2的小分子干扰RNA(siRNA)转染异位内膜基质细胞,转染后2 d换用分别含有10-8mol/L的17β-雌二醇或10-8mol/L的17β-雌二醇+10-6mol/L孕酮的培养液继续培养3 d,ELISA法检测上清液中SDF-1α的蛋白表达水平。结果(1)周期性变化:正常内膜中,SRC-1、SRC-2和SDF-1α的表达均具有周期性变化,增殖期mRNA的表达水平分别为5.6±1.2、3.8±1.1、2.7±0.5,分泌期的表达水平分别为2.6±1.0、2.1±1.0、1.6±0.5;分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);异位内膜缺乏周期性变化。(2)雌、孕激素培养不同时间后SDF-1α蛋白表达水平:17β-雌二醇培养异位内膜基质细胞48、72和96 h后,SDF-1α蛋白表达水平分别为(1 803±196)、(2 272±261)和(2 162±258)ng/L,17β-雌二醇+孕酮培养异位内膜基质细胞48、72和96 h后,SDF-1α蛋白表达水平分别为(1 307±150)、(1 518±301)和(1 550±144)ng/L。各时间点两者比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)沉默SRC基因对SDF-1α蛋白表达水平的影响:沉默异位内膜基质细胞中SRC-1后,17β-雌二醇培养72 h的异位内膜基质细胞SDF-1α蛋白的表达水平为(1 155±244)ng/L,较SRC-1沉默前的(2 313±357)ng/L下降50.04%,差异有统计学意义(P<0.05)。而沉默异位内膜基质细胞中SRC-2后,17β-雌二醇培养72 h的异位内膜基质细胞中SDF-1α蛋白表达水平为(1 958±324)ng/L,与沉默SRC-2前的(2 313±357)ng/L比较,差异无统计学意义(P>0.05)。沉默异位内膜基质细胞中SRC-2后,17β-雌二醇+孕酮培养72 h后的异位内膜基质细胞中SDF-1α蛋白表达水平为(2 051±380)ng/L,与沉默SRC-2前的(1 534±449)ng/L比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在甾体激素调控异位内膜基质细胞表达SDF-1α的作用中,SRC-1是雌激素的主要辅激活子,SRC-2是孕激素的主要辅激活子。
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单位南京医科大学第一附属医院
