摘要

目的 探讨马齿苋总黄酮(PTF)是否通过调控tribbles同源蛋白3(tribbles homolog 3,TRB3)表达影响缺氧/复氧(H/R)诱导的支气管上皮细胞损伤。方法 体外培养人支气管上皮细胞BEAS-2B,建立H/R诱导的细胞损伤模型,使用低(10 mg·L-1)、中(20 mg·L-1)、高浓度(40 mg·L-1)PTF处理细胞;用试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与Western blot法分别检测TRB3的mRNA及蛋白表达水平;再将si-TRB3、pcDNA-TRB3分别转染至BEAS-2B细胞,采用上述方法检测转染后LDH、MDA、SOD的水平及细胞凋亡率;Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)蛋白表达量。结果 与对照组比较,H/R组LDH、MDA的水平升高,SOD的水平降低,细胞凋亡率升高,Bax蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低,TRB3 mRNA及蛋白水平升高;与H/R组比较,H/R+PTF不同浓度组LDH、MDA的水平均降低,SOD的水平升高,细胞凋亡率降低,Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高,TRB3 mRNA及蛋白水平降低;与H/R+si-NC组比较,H/R+si-TRB3组LDH、MDA的水平降低,SOD的水平升高,细胞凋亡率降低,Bax蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高;TRB3过表达可减弱PTF对H/R诱导的支气管上皮细胞损伤的作用。结论 马齿苋总黄酮可能通过下调TRB3的表达从而减轻H/R诱导的支气管上皮细胞损伤。

  • 单位
    武汉华夏理工学院