摘要
目的探讨纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)对棕榈酸刺激后小鼠原代心肌细胞凋亡的作用及其可能机制。方法分离培养小鼠原代心肌细胞,分为对照组与棕榈酸组,Western blotting检测PAI-1及凋亡蛋白剪切型的半胱天冬酶3(cleaved-caspase 3)、BCL2关联X蛋白(Bax)表达。建立PAI-1低表达及过表达的心肌细胞,荧光定量PCR检测PAI-1基因的mRNA表达,Western blotting检测PAI-1、cleaved-caspase 3及Bax蛋白的表达。确定PAI-1小干扰RNA条件后给予棕榈酸刺激,分为对照组、PAI-1低表达组、棕榈酸组、PAI-1低表达+棕榈酸组,Western blotting检测cleaved-caspase 3、Bax及磷酸化核因子κB(p-NF-κB)的表达。最后,将棕榈酸组细胞给予NF-κB抑制剂Bay11-7082处理,分为棕榈酸组、PAI-1低表达+棕榈酸组、Bay11-7082+棕榈酸组、PAI-1低表达+Bay11-7082+棕榈酸组,Western blotting检测cleaved-caspase 3及Bax蛋白的表达。结果棕榈酸组的cleaved-caspase 3、Bax及PAI-1蛋白表达水平明显高于对照组;PAI-1低表达+棕榈酸组的cleaved-caspase 3、Bax及p-NF-κB蛋白表达水平明显低于棕榈酸组,差异均有统计学意义(P<0.01)。此外,Bay11-7082+棕榈酸组的cleaved-caspase 3及Bax蛋白表达水平明显低于棕榈酸组,PAI-1低表达+Bay11-7082+棕榈酸组的cleaved-caspase 3及Bax蛋白表达水平明显低于Bay11-7082+棕榈酸组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 PAI-1通过影响NF-κB通路参与对棕榈酸刺激后心肌细胞凋亡的调控。