小分子热休克蛋白HSPB1通过上调SIRT1减轻H2O2诱导的人血管内皮细胞早衰

作者：侯常苗; 刘更盛; 蒋宇; 刘艳娟; 邹联洪; 陈芳; 刘协红^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(11): 1929-1937.

• 细胞早衰
• HSPB1蛋白
• SIRT1信号通路
• 氧化应激
• 血管内皮细胞

目的：观察小分子热休克蛋白HSPB1是否减轻过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的人血管内皮细胞早衰，并从沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)信号通路来探讨其可能的作用机制。方法：将常规培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)随机分为空白对照组、50μmol/L H2O2组和H2O2+HSPB1过表达组。通过RT-q PCR法检测p16和p21的m RNA表达；衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-Gal)活性检测试剂盒检测SA-β-Gal活性；Western blot检测p53、p16、p21、血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的蛋白水平；流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。同时，通过沉默SIRT1基因，观察SIRT1对HSPB1减缓H2O2诱导HUVECs衰老的影响。结果：与H2O2组比较，HSPB1过表达可减轻H2O2诱导的HUVECs损伤，包括p16和p21 m RNA水平降低、SA-β-Gal活性及ROS水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。同时，HSPB1过表达可使p53、p16、p21、VCAM-1和ICAM-1蛋白水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。沉默SIRT1基因可逆转HSPB1对p16和p21 m RNA表达及组蛋白H2AX磷酸化的抑制作用(P<0.05或P<0.01)。同时，沉默SIRT1基因导致HSPB1抑制SA-β-Gal活性作用也显著减弱(P<0.01)。另外，SIRT1 si RNA逆转了HSPB1对p53、p21及p16蛋白表达的抑制作用(P<0.05或P<0.01)。结论：小分子热休克蛋白HSPB1能够有效减轻H2O2诱导的HUVECs早衰，其机制与激活SIRT1信号通路，抑制氧化应激反应有关。

• 单位
  湖南师范大学; 益阳市中心医院; 湖南中医药大学; 湖南省脑科医院; 湖南省人民医院