hsa_circ_0008039和miR-484在SK-N-SH细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤中的作用：与Fis1的关系

作者：袁阳; 于洋; 孙洪喜; 张高峰; 陈怀龙; 王明山^*

来源：中华麻醉学杂志, 2022, 42(01): 88-92.

• 微RNAs
• 神经母细胞瘤
• 肿瘤细胞, 培养的
• 低氧
• 线粒体蛋白质类

目的评价hsa_circ_0008039和miR-484在人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞氧糖剥夺-复糖复氧(OGD/R)损伤中的作用及其与线粒体分裂蛋白1(Fis1)的关系。方法体外培养SK-N-SH细胞至对数生长期, 采用随机数字表法分为5组(n=25):对照组(C组)、OGD/R组、hsa_circ_0008039 siRNA组(S组)、hsa_circ_0008039过表达组(E组)和hsa_circ_0008039 siRNA+miR-484抑制剂组(S+I组)。C组细胞在正常条件下培养;S组、E组和S+I组分别转染has_circ_0008039 siRNA、has_circ_0008039过表达载体、has_circ_0008039 siRNA和miR-484抑制剂后, 氧糖剥夺12 h复糖复氧24 h制备OGD/R损伤模型。于复糖复氧24 h时采用CCK-8法检测细胞活力和LDH漏出量, 采用RT-qPCR法检测hsa_circ_0008039、miR-484和Fis1 mRNA的表达, Western blot法检测Fis1表达;双荧光素酶报告验证hsa_circ_0008039与miR-484的靶向关系。结果与C组比较, 其余4组细胞活力降低, LDH漏出量增加, OGD/R组和E组hsa_circ_0008039和Fis1表达上调, miR-484表达下调, S组hsa_circ_0008039和Fis1表达下调, miR-484表达上调, S+I组hsa_circ_0008039和miR-484表达下调, Fis1表达上调(P<0.05);与OGD/R组比较, E组和S+I组细胞活力降低, LDH漏出量增加, S组细胞活力升高, LDH漏出量减少, E组hsa_circ_0008039和Fis1表达上调, miR-484表达下调, S组hsa_circ_0008039和Fis1表达下调, miR-484表达上调, S+I组hsa_circ_0008039和miR-484表达下调, Fis1表达上调(P<0.05);与S组比较, S+I组细胞活力降低, LDH漏出量增加, miR-484表达下调, Fis1表达上调(P<0.01)。双荧光素酶报告实验表明:has_circ_0008039靶向结合miR-484。结论 hsa_circ_0008039靶向结合miR-484参与了SK-N-SH细胞氧糖剥夺-复糖复氧损伤的过程, 与上调Fis1表达有关。

• 单位
  同济大学附属东方医院; 青岛市市立医院; 青岛大学