HMGB1小干扰RNA对鼻黏膜上皮细胞HMGB1/TLR4信号通路的影响

作者：刘洋; 鲍羿岐; 崔娜; 朱学伟^*

来源：中国实验诊断学, 2023, 27(03): 346-349.

DOI：10.3969/j.issn.1007-4287.2023.03.024

• 高迁移率族蛋白1
• 小干扰RNA
• 鼻黏膜上皮细胞
• TLR4
• 细胞信号传导通路

目的 研究采用小干扰RNA(si-RNA)沉默高迁移率族蛋白1(HMGB1)对人鼻黏膜上皮细胞(HNECs)Toll样受体4(TLR4)及其下游信号通路的影响。方法 体外培养人鼻黏膜上皮细胞，分为空白对照组、si-HMGB1组、脂多糖(LPS)组和LPS+si-HMGB1组。RT-PCR检测HNECs中HMGB1 mRNA的表达。Western blot检测4组细胞HMGB1、TLR4表达以及通路下游核因子-κB(NF-κB)和白介素1β(IL-1β)的表达水平。观察siRNA干扰HMGB1蛋白表达后鼻黏膜上皮细胞的相应变化。结果 RT-PCR结果显示，LPS组细胞中HMGB1的转录水平显著高于空白对照组(P<0.05)。LPS+si-HMGB1组HMGB1的mRNA转录水平显著低于LPS组(P<0.05)。Western blot检测结果显示，LPS+si-HMGB1组的TLR4,HMGB1蛋白表达水平明显低于LPS组，结果具有统计学意义(P<0.05)。LPS+si-HMGB1组细胞的NF-κB以及IL-1β水平明显低于LPS组(P<0.05)。结论 鼻黏膜上皮细胞表达HMGB1蛋白，通过siRNA沉默手段可以下调HMGB1的表达。LPS可以激活炎症性的HMGB1,TLR4,通路下游信号NF-κB及IL-1β。siRNA可以下调HMGB1蛋白表达水平，进而抑制TLR4-NF-κB以及IL-1β信号传导通路。

• 单位
  吉林大学中日联谊医院