血必净注射液经肌醇需求酶1α信号通路影响组织因子凝血活性

作者：柴彦; 李静远; 柴艳芬; 姚咏明

来源：中华急诊医学杂志, 2018, 27(02): 159-163.

• 脓毒症
• 肌醇需求酶1α
• 蛋白质二硫化物异构酶
• 活化凝血因子X
• 组织因子

目的探讨不同浓度血必净注射液对内毒素诱导大鼠内皮细胞组织因子(tissue factor,TF)凝血活性的影响。方法随机将内皮细胞分为对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组(500ng/mL)、血必净组(1、5、25μL/mL)、LPS+血必净组(1、5、25μL/mL),培养24、48和72 h后采用CCK-8法检测细胞增殖;留取上清,检测乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)释放量;以刺激72 h为观察点,采用Western blot技术检测肌醇需求酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)、未剪接型X盒结合蛋白(unspliced-box binding protein-1,uXBP-1)、剪接型X盒结合蛋白(spliced-box binding protein-1,sXBP-1)及蛋白质二硫化物异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)的表达水平;加入Ca2+、凝血因子(coagulation factor,F)Ⅶ和F X,用发色底物法检测活化FX a水平。结果与对照组相比,LPS组细胞增殖能力下降,LDH释放增多(P<0.05),IRE1α、uXBP1、sXBP1、PDI表达均上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,血必净组细胞增殖能力增强,LDH释放减少(P<0.05或P<0.01),随着时间增加,此效应逐渐增强;LPS+血必净组较LPS组细胞增殖活性升高,LDH释放下降(P<0.05或P<0.01),RE1α、uXBP1、sXBP1和PDI表达均明显减弱(P<0.01),F X a产生随IRE1α、XBP1、PDI表达水平降低而减少(P<0.05),其中LPS+5μL/mL血必净组降低F X a效果尤为明显(P<0.05)。结论血必净注射液能通过阻断IRE1α-XBP1通路,降低PDI的表达,影响内皮细胞TF凝血活性。

• 单位
  解放军总医院; 天津医科大学总医院