猪流行性腹泻病毒M蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

作者：张志榜; 陈建飞; 时洪艳; 杨斌; 石达; 陈小金; 冯力

来源：中国预防兽医学报, 2011, (07): 568-570.

• 猪流行性腹泻病毒
• M蛋白
• 单克隆抗体 porcine epidemic diarrhea virus
• M protein
• monoclonal antibody

为制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗M蛋白单克隆抗体(MAb),本研究以截短表达的His-M重组蛋白免疫BALB/c小鼠;以截短表达的GST-M重组蛋白作为包被抗原,采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA进行筛选,得到一株稳定分泌抗M蛋白MAb。MAb亚类鉴定为IgG2b型,轻链为κ链,杂交瘤细胞培养上清和诱导的小鼠腹水抗体效价分别为1∶3000和1∶2×105。Westernblot试验表明该MAb能够识别重组及天然的PEDVM蛋白。间接免疫荧光试验表明该MAb能够与PEDV感染的VeroE6细胞产生特异性免疫荧光。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 内蒙古农业大学